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第一篇 微生物学实验基本技术

第一章 常用仪器及无菌室简介

实验1 常用仪器及无菌室简介

 微生物学是一门实验性很强的医学基础学科,微生物学实验教学在整个微生物学的教学过程中占有很大的比重。所以有必要加强微生物学的实验教学工作。而要搞好微生物学的实验教学,必需具备一些基本实验条件。本部分简要介绍微生物学实验的一些常用仪器和其它基本实验条件。

一、灭菌器

(一)高压蒸气灭菌器

1.构造及原理:此种灭菌器为一个双层的金属圆筒,两层之间盛水。外层为坚厚的金属板,其上有金属厚盖,盖旁有螺旋,借以扣紧厚盖,厚盖与锅体之间为密封圈,使蒸气不能外溢。加热后,随着锅内蒸气压力的升高,其温度也相应增高,从而达到使待灭菌物品灭菌的目的。锅内蒸气压力与锅内温度的关系如表1-1

1-1 不同蒸气压力所能达到的温度

蒸气压力

温度(℃)

/平方厘米

公斤/平方厘米

kPa

5

0.35

33.78

108.8

8

0.57

54.04

113.0

10

0.70

67.55

115.6

15

1.0

101.33

121.3

20

1.46

135.10

126.2

25

1.77

168.88

130.4

30

2.10

202.66

134.6

    高压蒸气灭菌器盖上装有排气阀、安全阀,以调节灭菌器内蒸气压力。有温度计及压力表,以指示灭菌器内部的温度和压力。灭菌器内装有带孔的金属搁板,用以放置待灭菌物品。高压蒸气灭菌器的外形结构如图1-1

2 使用方法

1)在外层锅内加适量的水,将需要灭菌的物品放入内层锅,盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。

2)加热使锅内产生蒸气,当压力表指针达到 33.78kPa时,打开排气阀,将冷空气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将排气阀关好。

3)继续加热,锅内蒸气增加,压力表指针又上升,当锅内压力增加到所需压力时,将火力减小,按所灭菌物品的特点,使蒸气压力维持所需压力一定时间,然后将灭菌器断电或断火,让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物。

3.注意事项:

1)待灭菌的物品放置不宜过紧。

2)必须将冷空气充分排除,否则锅内温度达不到规定温度,影响灭菌效果。

3)灭菌完毕后,不可放气减压,否则瓶内液体会剧烈沸腾,冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。

4)装培养基的试管或瓶子的棉塞上,应包油纸或牛皮纸,以防冷凝水入内。

5)为了确保灭菌效果,应定期检查灭菌效果,常用的方法是将硫磺粉末(熔点为115℃)或安息香酸(熔点为120℃)置于试管内,然后进行灭菌试验。如上述物质熔化,则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求,灭菌的效果是可靠的。也可将检测灭菌器效果的胶纸(其上有温度敏感指示剂)贴于待灭菌的物品外包装上,如胶纸上指示剂变色,亦说明灭菌效果是可靠的。

6)现在已有微电脑自动控制的高压蒸气灭菌器,只需放去冷气后,仪器即可自动恒压定时,时间一到则自动切断电源并鸣笛,使用起来很方便。

应用:为最常用的灭菌方法,一般以 101.33kPa处理1520min,可达到对物品进行灭菌的目的。凡耐高温和潮湿的物品,如常用培养基、生理盐水、衣服、纱布、玻璃器材等都可用本法灭菌。

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